牛肉膏蛋白胨培养基的配制——郑州四中科学松鼠会社团活动纪实

作者：任焰责编：刘少强发布时间：2022-04-15

称量蛋白胨

称量琼脂

倒平板

对培养皿及锥形瓶灭菌

溶化1

溶化

4月14日，郑州四中科学松鼠会迎来本学期第四次社团课，重点学习牛肉膏蛋白胨培养基的配制。

牛肉膏蛋白胨培养基又称为肉汤培养基，是一种应用十分广泛的天然培养基，主要用来培养细菌。其中的牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料，含糖、维生素、蛋白质等营养物质。牛肉膏能够为微生物的生长提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素。

实验材料：

牛肉膏5g、蛋白胨10、NaCl 5g、琼脂20g、蒸馏水定容至1000ml

实验步骤：

1.计算

根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制500mL的培养基时各种成分的用量。

2.称量

准确称取各种成分。牛肉膏比较黏稠，可以用玻棒挑取，放在称量纸上称量。牛肉膏和蛋白陈都容易吸潮，称取时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。

3.溶化

将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其溶解。加入琼脂，加热使其熔化。在此过程中，不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。当琼脂完全熔化后，补加蒸馏水500mL。

4.灭菌

将配制好的培养基转移到锥形瓶，放入高压蒸汽灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃条件下，灭菌15-30min。将培养皿放入干热灭菌箱内，在160-170℃下灭菌2h。

5.倒平板

待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作如下：

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

②右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。

③用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10-20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿盖。

④等待平板冷却凝固（大约5-10min）后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。

该培养基的制作只是进行微生物培养的第一步，准备好培养基才可以进行后续微生物的培养、分离、计数及鉴定等研究。微生物虽过于微小，但在自然界作用非凡。生物学发展历史表明，诸多革命性的改变人类对生命认识的事件都与微生物有关。相信在逐步深入的探索中，你会充分体会到动手动脑做科学的乐趣。